Ainete segu lahutamine geelkromatograafia meetodil
vesilahusega ning kogutakse eluaati kindla mahuga fraktsioonide kaupa.
Töö käik
Ettevalmistus
· Töös kasutasin geeli Sephadex G-75 ning tema fraktsioneerimispiirkond on 3000-80000D, k = 0,1
· Täidise kõrguseks mõõtsin L = 32cm ja läbimõõduks d = 1,7cm -> r = 0,85cm
· Arvutasin täidise kogumahu: Vt = L·r2= 32 · 0,852 = 72,63cm3
· Arvutasin geelmaatriksi mahu: Vg = k·Vt = 72,63 · 0,1 = 7,263cm3 ja maksimaalse eludeerimismahu
Vxmax = Vt Vg = 72,63 7,273 =65,357 cm3
· Arvutasin fraktsioonide üldarvu teades, et ühe fraktsiooni maht on 2ml. n = Vxmax/2 = 65,357 / 2 33
· Nummerdasin katseklaasid
Praktiline töö
· Avasin kolonni väljavooluava ja täidise kohal olev voolutuslahus hakkas aeglaselt tilkuma keeduklaasi.
· Reguleerisin kolonni voolutuskiiruseks ligikaudu 1ml/min
· Kui vedeliku tase langes geeli pinnani sulgesin kiiresti väljavooluava.