Mikroobifusioloogia
Rakkude ettekasvatamisel on oluline kasvufaas. E. coli rakud on
elektroporeerimisele vastupidavamad logaritmilise faasi lõpus, samas hilises
kasvufaasis väheneb rakkude võime muutuda kompetentseks. Lactobacillus
lactis, Pseudomonas putida korral tehakse kompetentseid rakke statsionaarse
faasi rakkudest. Bacillus cereus, Bacillus thuringiensis aga varajasest
logaritmilisest faasist.
Elektroporeerimise korral on oluline, et kompetentseid rakke pestaks
korralikult enne elektroporeerimist, sest kõrge ioonjõud vähendab
elektroporeerimise efektiivsust. Elektroporeerimise puhver on üldjuhul
isotooniline, vältimaks rakkude lüüsi pärast elektriimpulssi. Nt 10 % glütserool või
300 mM sahharoos on piisav vastavalt E. coli ja Pseudomonas putida efektiivseks
elektroporeerimiseks.
Elektroporeerimine toimub üldjuhul madalal temperatuuril. Nt E. coli rakke
peab ette valmistama jääl, samas kui Pseudomonas putida korral pole
ettevalmistamistemperatuur oluline